免疫組化用伊紅染色液測定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

2.各ELISA板不應疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應的時(shí)間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗臺上，以便 不時(shí)觀(guān)察，待對照管顯色適當時(shí)，即可終止酶反應。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應步驟，但卻 是決定實(shí)驗成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。