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HNP1-3 人中性粒細胞防御素1-3elisa應用操作步驟

日期:2024-05-21瀏覽:141次

HNP1-3 人中性粒細胞防御素1-3elisa應用操作步驟:

夾心法,一般的操作步驟為:

將具有專(zhuān)一性的抗體固著(zhù)于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余抗體;

加入待測檢體,檢體中若含有待測的抗原,則其會(huì )與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結;

洗去多余待測檢體,加入另一種對抗原專(zhuān)一的一次抗體,與待測抗原進(jìn)行鍵結;

洗去多余未鍵結一次抗體,加入帶有酶的二次抗體,與一次抗體鍵結;

洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或儀器讀取呈色結果;

間接法,一般的操作步驟為:

將已知的抗原固著(zhù)于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余的抗原。

加入待測檢體,檢體中若含有待測的一次抗體,則其會(huì )與塑膠孔盤(pán)上的抗原進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結。

洗去多余待測檢體,加入帶有酶的二次抗體,與待測的一次抗體鍵結。

洗去多余未鍵結二次抗體,加入酶底物使酶呈色,藉儀器測定塑膠盤(pán)中的吸光值,以評估有色終產(chǎn)物的含量即可測量待測抗體的含量。

競爭法,其操作步驟為:

將具有專(zhuān)一性的抗體固著(zhù)于塑膠孔盤(pán)上,完成后洗去多余抗體

加入待測檢體,使檢體中的待測抗原與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結

加入帶有酶的抗原,此抗原也可與塑膠孔盤(pán)上的抗體進(jìn)行專(zhuān)一性鍵結,由于塑膠孔盤(pán)上固著(zhù)的抗體數量有限,因此當檢體中抗原的量越多,則帶有酶的抗原可鍵結的固著(zhù)抗體就越少,亦即,兩種抗原皆競相與塑膠孔盤(pán)上抗體鍵結,即所謂競爭法之由來(lái)。


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