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更新時(shí)間:2020-08-11
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時(shí)使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時(shí)菌液加量不宜過(guò)多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來(lái)吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進(jìn)行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進(jìn)行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍的微生物保存法。
生孢梭菌(產(chǎn)芽孢梭狀芽孢桿菌)規格培養溫度: 35-37℃英文名稱(chēng):Clostridium botulinum (Clostridium clostridium)培養保藏法:培養后于4—6℃冰箱內保存。公司專(zhuān)業(yè)代理ATCC菌種,質(zhì)量保證,為大中型科研提供嚴格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標準菌株。
實(shí)驗內容:
1.稱(chēng)量→溶化→調pH→過(guò)濾→分裝→加塞→包扎→滅菌→無(wú)菌檢查
2.干熱滅菌:裝入待滅菌物品→升溫→恒溫→降溫→開(kāi)箱取物
3.高壓蒸汽滅菌:加水→裝物品→加蓋→加熱→排冷空氣→加壓→恒壓→降壓回零→排汽→取物→無(wú)菌檢查
4.過(guò)濾除菌:組裝滅菌→連接→壓濾→無(wú)菌檢查→清洗滅菌
微生物培養方法:
1、平板劃線(xiàn)分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養基表面,通過(guò)分區劃線(xiàn)稀釋而得到較多獨立分布的單個(gè)細胞,經(jīng)培養后生長(cháng)繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋?zhuān)缓髮⒉煌♂尪鹊木悍謩e涂布到瓊脂固體培養基的表面進(jìn)行培養,在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細胞,從而能在培養基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現觀(guān)察菌落特征的目的,但平板劃線(xiàn)分離法不能對菌落計數,而稀釋涂布平板法培養過(guò)程復雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養基溶液倒入培養皿,輕輕搖動(dòng)培養皿,使培養基溶液均勻分布在培養皿底部,待培養基溶液凝固后即得平板培養基。
b、制備活性污泥混合液稱(chēng)取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無(wú)菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無(wú)菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無(wú)菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養基表面的中央位置,用無(wú)菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
具有兩大功能:
( 1 )通過(guò)灌根可有效防治植物細菌性和真菌性土傳病害,同時(shí)可使植物葉部的細菌和真菌病害明顯減少;
( 2 )對植物具有明顯的促生長(cháng)、增產(chǎn)作用。 多粘類(lèi)芽孢桿菌對細菌性土傳病害 ―― 植物青枯病具有很好的防治效果,在收獲后期,對番茄、茄子、辣椒、煙草、馬鈴薯、羅漢果和生姜青枯病(姜瘟病)的田間防效可達 70 ~ -- %,增產(chǎn)率達 493 %,甚至當對照發(fā)病率高達 -- %時(shí)防效也是如此。 多粘類(lèi) 芽孢桿菌 對芋頭軟腐病、大白菜軟腐病、辣椒 根腐病 、花卉根腐病、玉竹根腐病、沙參根腐病、番茄猝倒病、番茄立枯病以及辣椒疫病等土傳 病害 也具有較好的防治作用。 此外,多粘類(lèi)芽孢桿菌對 植物 具有明顯的促生長(cháng)作用,可使田間植株高度比空白對照區增加 10-30cm ;甚至在植物不發(fā)青枯病時(shí),也可使植物的產(chǎn)量增加 27.5% ,且增產(chǎn)主要表現為收獲前期。
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聚乙烯,分子量約1,100放線(xiàn)菌素D,粉末
生孢梭菌(產(chǎn)芽孢梭狀芽孢桿菌)規格人狀腺癌細胞25-Hydroxycholesterol (≥98%)
人滑膜肉瘤細胞D-(+)-Melibiose (≥99.0%)
人胃癌細胞D-(+)-Cellobiose (≥99.0%,TLC)
人胃癌細胞N-Hippuryl-His-Leu Hydrate (≥98%,HPLC)
人胃癌細胞DL-Propargylglycine
人胃癌細胞(未分化)Wort Agar
人胃腺癌細胞Cadmium Chloride Hemi(Pentahydrate) (...
人前列腺癌細胞Chlorpromazine hydrochloride (≥98%,TLC)
人前列腺癌細胞Tetrabutylammonium Dihydrogen Phosphat...
保存方法:
傳代保存法:培養基的濃度不宜過(guò)高,營(yíng)養成分不宜過(guò)于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養溫度通常以稍低于適生長(cháng)溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應在培養基中添加少量碳酸鈣 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時(shí)間更長(cháng),適用于霉菌、酵母菌、放線(xiàn)菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線(xiàn)菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長(cháng)達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進(jìn)行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
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