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更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠肺小動(dòng)脈平滑肌細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肺小動(dòng)脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7742 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠肺小動(dòng)脈平滑肌分離自肺小動(dòng)脈組織;小動(dòng)脈(smallartery),管徑在0.3~1mm之間,小動(dòng)脈包括粗細不等的幾級分支,也屬肌性動(dòng)脈。較大的小動(dòng)脈,內膜有明顯的內彈性膜,中膜有幾層平滑肌,外膜厚度與中膜相近,一般沒(méi)有外彈性膜。小動(dòng)脈是決定周?chē)h(huán)阻力大小的主要因素,也是調節微循環(huán)灌注量的“總開(kāi)關(guān)"。典型的小動(dòng)脈,其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動(dòng)脈為厚,當平滑肌在神經(jīng)支配下強力收縮時(shí),其管腔可以閉塞,而使血液不能流入它所分布的毛細血管內,從而增加了周?chē)貉h(huán)的阻力。如果有許多小動(dòng)脈同時(shí)收縮,可使血壓顯著(zhù)上升。反之,當小動(dòng)脈的平滑肌舒張時(shí),則可使大量的血液流入毛細血管,外周阻力明顯下降,血壓降低。終末小動(dòng)脈(terminal arteri-ole)的口徑為20~30μm;后小動(dòng)脈(metar-teriole),又稱(chēng)毛細血管前小動(dòng)脈(precapil-lary arteriole)的口徑為12~15μm。管壁內均有較稀疏的平滑肌,在毛細血管前小動(dòng)脈分支的起始部分,管壁平滑肌成分增厚,叫做毛細血管前括約?。?span>precapillary sphinc-ter),其收縮或舒張,可調節真毛細血管的血流量,是調節微循環(huán)灌注量的“分開(kāi)關(guān)"。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠肺小動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái)制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠肺小動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次;
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
瑞氏-姬姆薩復合染液 Vascular permeability test solion
姬姆薩染液 Peroxidase staining
巴氏染液(脫落細胞染色) Name
快速H-E組織細胞及脫落細胞染液 Phosphate buffer
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4 (CTLA-4/CD152) ELISA kit E 人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)試劑盒E
Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumancaneousTcell-atactingchemokine,CTACK試劑盒人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)試劑盒規格:96T/48T
組織EPHB4激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProgesterone,PROGELISAKit人孕激素/孕同(PROG)試劑盒規格:96T/48T
轉錄激活蛋白CRSP9抗體
白細胞介素增強子結合因子2抗體
ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素
TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標簽)
IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白
Insulin protein (from porcine pancreas 0.5mgInsulin protein (from porcine pancreas) 豬胰島素
IL18 Protein Human 重組人 IL18 / Interleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 標簽)
ACE2重組食蟹猴 ACE2 / Angiotensin-Converting Enzyme 2 蛋白 Protein
IL36B Protein Mouse 重組小鼠 IL1F8 / IL36b 蛋白
TLK1重組人 TLK1 / PKU-beta 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠肺小動(dòng)脈平滑肌細胞小鼠能a1A受體(ADRA1A)ELISA 試劑盒
Kappa aibodies to human immunoglobulin light chain (-IgLC) ELISA Kit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)試劑盒
HumanleucocyteaigenB27,HLA-B27ELISAKit 人類(lèi)白細胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
FishhighsensitivityC-ReactiveProtein,hs-CRP試劑盒魚(yú)類(lèi)超敏C反應蛋白(hs-CRP)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母蛋白巰基/結合巰基含量比色法定量試劑盒20次
MouseComplemefragme3a,C3aELISAKit小鼠補體片斷3a(C3a)試劑盒規格:96T/48T
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