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廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商

訪(fǎng)問(wèn)量：329

更新時(shí)間：2025-04-09

大鼠骨骼肌細胞

商品屬性：

細胞簡(jiǎn)介：

大鼠骨骼肌分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱(chēng)橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長(cháng)柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結構和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進(jìn)行隨意運動(dòng)。肌肉可根據共形狀、大小、位置、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內有許多沿細胞長(cháng)軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線(xiàn)稱(chēng)H線(xiàn)。H線(xiàn)的中部有一M線(xiàn)。明帶中間，有一條較暗的線(xiàn)稱(chēng)為Z線(xiàn)。兩個(gè)Z線(xiàn)之間的區段，叫做一個(gè)肌節。骨骼肌細胞也稱(chēng)橫紋肌細胞，細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方，細胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌細胞原代分離培養3天后，可見(jiàn)細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長(cháng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng)，高低起伏；細胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。

原代細胞的培養條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

　　1、細胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí)，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養

　　1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進(jìn)行分瓶試驗；

　　4、長(cháng)期培養時(shí)，淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長(cháng)；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗室分離的大鼠骨骼肌采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗室分離的大鼠骨骼肌經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(cháng)特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以?xún)葼顟B(tài)最佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。

　?、?消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長(cháng)的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　?、芷鞴倥囵B

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節作用。

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