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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
人宮頸癌成纖維細胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
人宮頸癌成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品：PAP1結合蛋白抗體 FAM23A蛋白抗體 細胞膜鈣ATP酶4抗體 人骨髓來(lái)源內皮祖細胞 兔心肌成纖維細胞 SW 156 [SW-156, SW156]人腎細胞癌細胞 MA-782 (小鼠乳腺癌細胞)
產(chǎn)品型號：
廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量：336
更新時(shí)間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
人宮頸癌成纖維細胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
宮頸癌組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7616 |
細胞簡(jiǎn)介：
人宮頸癌組織源成纖維分離自患有宮頸癌病人的宮頸癌組織；宮頸癌也稱(chēng)子宮頸癌，指發(fā)生在子宮陰道部及宮頸管的惡性腫瘤，是女性常見(jiàn)惡性腫瘤之一，發(fā)病率位于女性腫瘤的位。宮頸癌可向鄰近組織和器官直接蔓延，向下至陰道穹窿及陰道壁，向上可侵犯子宮體，向兩側可侵犯盆腔組織，向前可侵犯膀胱，向后可侵犯直腸。也可通過(guò)淋巴管轉移至宮頸旁、髂內、髂外、腹股溝淋巴結，晚期甚至可轉移到鎖骨上及全身其他淋巴結。血行轉移比較少見(jiàn)，常見(jiàn)的轉移部位是肺、肝及骨。腫瘤微環(huán)境即腫瘤細胞生存的外部環(huán)境，由不同種類(lèi)的非腫瘤性的細胞與細胞外基質(zhì)（Extracellular matrix，ECM）構成，包括纖維細胞，免疫細胞，內皮細胞，間充質(zhì)干細胞等，腫瘤細胞通過(guò)調控這些間質(zhì)細胞，創(chuàng )造出有利于自身侵襲轉移的條件，從而使得腫瘤得到進(jìn)展。越來(lái)越多的證據表明，腫瘤微環(huán)境的改變在腫瘤進(jìn)展中扮演著(zhù)重要的角色。在腫瘤微環(huán)境中，研究最多也是最主要的間質(zhì)細胞是腫瘤相關(guān)成纖維細胞（cancer-associated fibroblasts, CAFs）。CAFs 主要由腫瘤周邊的正常成纖維細胞和成纖維細胞樣細胞演化而來(lái)。宮頸癌組織源成纖維細胞多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。剛分離的宮頸癌組織源成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(cháng)，不聚集成團；細胞生長(cháng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長(cháng)，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗室分離的人宮頸癌成纖維采用混合膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗室分離的人宮頸癌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以?xún)葼顟B(tài)最佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豚鼠P物質(zhì) 英文名稱(chēng)： Guinea pig Substance P 規格： 英文縮寫(xiě)： SP
豚鼠睪激素 英文名稱(chēng)： Guinea pig Testosterone 規格： 英文縮寫(xiě)： TESTO
豚鼠免疫球蛋白E 英文名稱(chēng)： Immunoglobulin E 規格： 英文縮寫(xiě)： IgE
豚鼠粘多糖 英文名稱(chēng)： Mucopolysaccharide 規格： 英文縮寫(xiě)： MLC
小鼠超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat prostaglandin E2 (PGE2) ELISA Kit 大鼠前列腺素E2(PGE2)試劑盒
Human8-epi-prostaglandinF2alpha,8-epi-PGF2αELISAKit 人8-異構前列腺素F2α(8-epi-PGF2α)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBigEndothelin,BigET試劑盒人大內皮素(BigET)試劑盒規格：96T/48T
植物總氨基酸含量比色法定量試劑盒20次
HumanSuperOxidaseDimase,SODELISAKit人超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒規格：96T/48T
橋粒斑菲素蛋白3抗體
轉錄因子ELYS蛋白抗體
M1重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein
PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽
RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein
FSTL5 Protein Human 重組人 FSTL5 蛋白 (Fc 標簽)
EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標簽)
PT141(Bremelanotide PT-141 1gPT141(Bremelanotide PT-141) 雌性激素肽
FSTL5 Protein Human 重組人 FSTL5 蛋白 (Fc 標簽)
M1重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 蛋白 Protein
EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白 (His & Fc 標簽)
RELT重組人 RELT / TNFRSF19L 蛋白 Protein
人宮頸癌成纖維細胞大鼠血紅素氧合酶1(HO1)試劑盒 ，英文名： HO1 ELISA Kit
Mouse coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 小鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒
Mousetumornecrosisfactor-relatedapoptosis-inducingligand3,AILR3ELISAKit 小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導配體3(AIL-R3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumancecropinB,CecBELISAKit人殺菌肽B
細胞C-MET激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitDAT大鼠多巴胺轉運蛋白
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí)，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長(cháng)期培養時(shí)，淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長(cháng)；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
