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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
人結腸黏膜上皮細胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
人結腸黏膜上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：肌動(dòng)蛋白結合蛋白IPP抗體 FAM59A蛋白抗體 紅細胞膜蛋白4.2抗體 人顱蓋造骨細胞 兔乳腺成纖維細胞 VM-CUB-1人膀胱癌細胞 D341Med(人髓母細胞瘤細胞)
產(chǎn)品型號：
廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量：366
更新時(shí)間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
人結腸黏膜上皮細胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
結腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7160 |
細胞簡(jiǎn)介：
人結腸黏膜上皮分離自結腸組織；結腸在右髂窩內續于盲腸，在第3骶椎平面連接直腸。結腸分升結腸、橫結腸、降結腸和乙狀結腸4部分，大部分固定于腹后壁，結腸的排列酷似英文字母“M"，將小腸包圍在內。結腸橫切面由內到外依次為：黏膜（上皮層、固有層、黏膜肌層），黏膜下層（疏松結締組織），肌層（內環(huán)形、外縱行兩層平滑?。?，外膜（纖維膜或漿膜）。腸黏膜上皮細胞是機體內外環(huán)境的重要屏障，持續暴露于大量抗原中，也是機體面對病原微生物的道防線(xiàn)。因此，腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著(zhù)重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞，在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質(zhì)和強度。探討正常結腸黏膜上皮細胞的分離、體外培養方法，為研究腸黏膜上皮細胞以及與腸黏膜相關(guān)疾病建立合適的細胞模型。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗室分離的人結腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗室分離的人結腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血小板活化因子(PAF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠橫紋肌輔肌動(dòng)蛋白α(smActinin-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠肌球蛋白(MYS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 大鼠干細胞因子受體(SCFR)試劑盒
Humanchondroitinsulfate,CSELISAKit 人(CS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chicken17-ketosteroids,17-KS試劑盒雞17-同類(lèi)固醇(17-KS)試劑盒規格：96T/48T
遠西方雜交(FARWESTERNBLOT)印跡消除試劑盒20次
Mousehypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit小鼠低氧誘導因子1α(HIF-1α)試劑盒規格：96T/48T
醇結合蛋白4抗體
AF680標記的山羊抗人乙肝表面抗原抗體
EFNA1重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2 0.5mgASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原
NEIL1重組人 NEIL1 蛋白 Protein
CD63 Protein Human 重組人 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
THY1 Protein Rat 重組大鼠 CD90 / THY-1 蛋白
ASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2 0.5mgASPP2(apoptosis stimulating protein of P53 2) P53凋亡刺激蛋白2抗原
CD63 Protein Human 重組人 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
EFNA1重組小鼠 Ephrin-A1 / EFNA1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
THY1 Protein Rat 重組大鼠 CD90 / THY-1 蛋白
NEIL1重組人 NEIL1 蛋白 Protein
人結腸黏膜上皮細胞大鼠心肽(ANP)試劑盒 ，英文名： ANP ELISA Kit
Pla vitamin B12 (VB12) ELISA Kit 植物B12(VB12)試劑盒
Mouseplasminogenactivatorinhibitor1,PAI-1ELISAKit 小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanai-IVIgGaibodyELISAKit人抗IVIgG抗體
細胞GRK4α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitCRH大鼠促腎上皮質(zhì)激素釋放激素
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí)，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長(cháng)期培養時(shí)，淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長(cháng)；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
