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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
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更新時(shí)間:2025-04-09
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱(chēng):兔肝實(shí)質(zhì)細胞
組織來(lái)源:肝臟
產(chǎn)品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
培養信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基:含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(cháng)特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1代,不建議傳代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡(jiǎn)介:
兔肝實(shí)質(zhì)分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著(zhù)去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝實(shí)質(zhì)細胞是指具有肝功能的單位,是肝臟的基本組成單位之一。肝實(shí)質(zhì)細胞與主要病生理變化:急性肝炎、肝硬化、肝膿腫。肝實(shí)質(zhì)細胞屬于中高度分化細胞,生長(cháng)營(yíng)養需求高,在體外存活時(shí)間短;細胞呈圓形或多角形,核大而圓,居中,常染色質(zhì)豐富,部分有雙核或多倍體核。肝臟作為體內重要的器官,在整個(gè)物質(zhì)代謝過(guò)程中具有廣泛而多樣的作用。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗室分離的兔肝實(shí)質(zhì)采用混合酶灌流消化、反復低速離心制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的兔肝實(shí)質(zhì)經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過(guò)夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
收到細胞如何處理?
1、首先,觀(guān)察細胞培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續服務(wù)依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題,部分貼壁細胞會(huì )有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時(shí),以便穩定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū),了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續服務(wù)依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長(cháng)狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長(cháng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細胞培養瓶?jì)扰囵B基,預留5ml左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養瓶?jì)纫后w全部轉移至50ml無(wú)菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細胞密度超過(guò)80%,可將細胞懸液分至2個(gè)細胞培養瓶?jì)扰囵B,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過(guò)80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密度達80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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GPT2 Protein Rat 重組大鼠 GPT2 蛋白
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CNTF Protein Human 重組人 CNTF 蛋白
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