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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
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更新時(shí)間:2025-04-09
兔肌源性干細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
骨骼肌組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7080 |
細胞簡(jiǎn)介:
兔肌源性干分離自肌肉組織;肌源性干細胞(MDSCs)屬于成體多能干細胞,具有多細胞系分化和自我更新能力。通過(guò)誘導刺激,MDSCs可以分化為脂肪、骨骼、軟骨、平滑肌和神經(jīng)細胞等多種細胞和組織類(lèi)型;作為基因治療和組織工程的供體細胞,已成為治療心肌梗死、Duchenne氏肌營(yíng)養不良等疾病的研究熱點(diǎn);近年來(lái),肌源性干細胞在治療尿失禁等方面的應用逐步得到重視。需注意的是,肌源性干細胞主要存在于骨骼肌組織中,只是成熟組織的很少部分細胞;平時(shí)處于靜止狀態(tài),在細胞應激和組織缺失時(shí)才會(huì )激活;并且隨著(zhù)年齡的增加,所含細胞數量逐漸減少,而目前臨床疾病的治療主要是針對成體進(jìn)行。肌源性干細胞的體外擴增對細胞移植和干細胞介導的基因治療至關(guān)重要。對肌源性干細胞的擴增研究發(fā)現,EGF、FGF-2和SCF可以通過(guò)減數分裂或促使不分裂細胞進(jìn)入有絲分裂周期,從而刺激細胞增生。更重要的是,細胞因子誘導的體外擴增可以通過(guò)自我更新不刺激細胞分化,從而保持干細胞表型。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的兔肌源性干采用膠原酶--聯(lián)合消化法結合密度梯度離心、差速貼壁法,最后通過(guò)肌源性干細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的兔肌源性干經(jīng)Sca-1免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠轉酶試劑盒 小鼠轉酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠轉酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠轉酶試劑盒、小鼠轉酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠基轉移酶試劑盒 小鼠基轉移酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠基轉移酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠基轉移酶試劑盒、小鼠基轉移酶eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠表皮生長(cháng)因子試劑盒 小鼠表皮生長(cháng)因子試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠表皮生長(cháng)因子試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠表皮生長(cháng)因子試劑盒、小鼠表皮生長(cháng)因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠棒狀桿菌試劑盒 小鼠棒狀桿菌試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠棒狀桿菌試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠棒狀桿菌試劑盒、小鼠棒狀桿菌eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠己糖激酶(HK)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human sorbitol dehydrogenase (SDH) ELISA Kit 人脫氫酶(SDH)試劑盒
HumanDNABindingProtein,DBPELISAKit 人DNA結合蛋白(DBP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAi-glucoprotein210,GP210試劑盒人抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒規格:96T/48T
植物賴(lài)羥化酶(lysylhydroxylase)活性比色法定量試劑盒20次
HumanVitaminA,VAELISAKit人A(VA)試劑盒規格:96T/48T
P物質(zhì)抗體
連接粘附分子2抗體
NRP1重組人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)重組蛋白 Recombinant Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor (AGER)
LALBA重組人 LALBA / Alpha-lactalbumin 蛋白 (Fc 標簽) Protein
EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)重組蛋白 Recombinant Advanced Glycosylation End Product Specific Receptor (AGER)
EPCAM Protein Human 重組人 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
NRP1重組人 Neuropilin-1 / NRP1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/WSN/1933) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白
LALBA重組人 LALBA / Alpha-lactalbumin 蛋白 (Fc 標簽) Protein
兔肌源性干細胞大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF/CSF2)試劑盒 ,英文名: GMCSF/CSF2 ELISA Kit
Mouse keratinocyte aocrine factor (KAF) ELISA Kit / amphiregulin (AR) ELISA Kit 小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)試劑盒/雙調蛋白(AR)試劑盒
Mousebonemorphogeneticproteins,BMPsELISAKit 小鼠骨形成蛋白(BMPs)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanpaxillin,PaxELISAKit人樁蛋白
同位素[γ32P]ATP激酶標記微衛星擴增試劑盒20次
ELISAKitPIAb-IgG/IgM大鼠0脂酰肌醇抗體IgG/IgM
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