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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
小鼠骨髓樹(shù)突狀細胞(成熟DC細胞)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
小鼠骨髓樹(shù)突狀細胞(成熟DC細胞)公司正在出售的產(chǎn)品：轉化相關(guān)基因MED11抗體 鋅指蛋白100抗體 跨膜蛋白161A抗體 小鼠頜下腺上皮細胞 大鼠心臟微血管內皮細胞 HCC-1195人非小細胞肺癌細胞 kyse30人食道癌細胞
產(chǎn)品型號：
廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量：403
更新時(shí)間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠骨髓樹(shù)突狀細胞(成熟DC細胞)
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
骨髓 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 圓形，樹(shù)突狀 | YS-01X7891 |
細胞簡(jiǎn)介：
小鼠骨髓樹(shù)突狀分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(cháng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱(chēng)為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿(mǎn)全身骨髓腔，隨著(zhù)年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的；樹(shù)突狀細胞分為成熟樹(shù)突狀細胞和未成熟樹(shù)突狀細胞，典型的未成熟樹(shù)突狀細胞呈半貼壁生長(cháng)，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細胞大而形態(tài)不規則，表面皺褶多，亦可見(jiàn)少量短刺狀突，胞內細胞器豐富并可見(jiàn)吞噬泡，具有較強的遷移能力，伴隨有部分未誘導成的單核細胞，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹(shù)突狀細胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導而成，多數呈懸浮生長(cháng)， 細胞呈圓形，細胞體積進(jìn)一步增大，表面大量粗細不等的樹(shù)枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀(guān)察到 )，伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長(cháng)時(shí)間培養也可能導致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無(wú)特異性細胞表面分子標志，主要通過(guò)形態(tài)學(xué)、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹(shù)突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，進(jìn)而激活T淋巴細胞，誘導免疫應答，處于啟動(dòng)、調控、并維持免疫應答的中心環(huán)節；未成熟樹(shù)突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應答，不能激活T細胞的信號，可導致T細胞無(wú)能，從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹(shù)突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類(lèi)分子等共刺激分子表達較低，一般在30%以下。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗室分離的小鼠骨髓成熟DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個(gè)核細胞、培養過(guò)程添加細胞因子誘導而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗室分離的小鼠骨髓樹(shù)突狀(成熟DC細胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態(tài)等綜合鑒定，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
培養基：含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(cháng)特性：半貼壁半懸浮
細胞形態(tài)：圓形，樹(shù)突狀
傳代特性：屬于高度分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
小鼠骨髓樹(shù)突狀細胞(成熟DC細胞)體外培養周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養，以此保證該細胞的優(yōu)良培養狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
轉氫酶-1試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
轉氫酶-2試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
α戊二酸脫氫酶（α-KGDH）測試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
檸檬酸（CA）含量測試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
豬胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白Ⅱ(IGFBP-Ⅱ)試劑盒
Human cyclic guanosine monophosphate (cGMP) ELISA Kit 人環(huán)0酸鳥(niǎo)苷(cGMP)試劑盒
RabbitUrokinase-typePlasminogenActivatorReceptor,PLAUR/uPARELISAkit 兔型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAP12(Mouseapelin12)ELISAKit小鼠apelin12
血清樣品樹(shù)脂法去內毒素試劑盒20次
Porcineierleukin17,IL-17ELISAKit豬白介素17(IL-17)試劑盒
丙酮酸脫氫酶α1抗體
粘蛋白-1單克隆抗體
FCGR3A重組大鼠 CD16a / FCGR3A 蛋白 (His 標簽) Protein
histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白多肽 0.5mghistone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白多肽
FABP1重組人 L-FABP / FABP1 蛋白 (His 標簽) Protein
BPIFA2 Protein Human 重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (His 標簽)
DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His 標簽)
histone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白多肽 0.5mghistone H3-like protein 組蛋白H3樣蛋白多肽
BPIFA2 Protein Human 重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (His 標簽)
FCGR3A重組大鼠 CD16a / FCGR3A 蛋白 (His 標簽) Protein
DDR1 Protein Mouse 重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 (His 標簽)
FABP1重組人 L-FABP / FABP1 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠骨髓樹(shù)突狀細胞(成熟DC細胞)大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒 ，英文名： Cr ELISA Kit
Rabbit ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 兔子α干擾素(IFN-α)試劑盒
伯氏疏(BB)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?span>) 48T
CLIAKitforMMP-1(Rabbitmaixmetalloproteinase1)ELISAKit兔基質(zhì)金屬蛋白酶1
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-9)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitTn-Ⅰ犬肌鈣蛋白Ⅰ
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí)，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長(cháng)期培養時(shí)，淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長(cháng)；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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