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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
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更新時(shí)間:2025-04-09
小鼠膀胱平滑肌細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
膀胱組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7231 |
細胞簡(jiǎn)介:
小鼠膀胱平滑肌分離自膀胱組織;膀胱是主要由平滑肌細胞組成的中空器官,膀胱平滑肌的舒張和收縮使得膀胱分別儲存和排出尿液。膀胱平滑肌細胞表型的調控和可誘導一氧化氮合酶的表達與多種病理狀況有關(guān),包括膀胱功能障礙。研究表明,組織缺氧抑制膀胱平滑肌細胞的增殖,膀胱平滑肌細胞的分化依賴(lài)于膀胱上皮細胞釋放的因子。膀胱平滑肌細胞外基質(zhì)的分泌表型可通過(guò)細胞所經(jīng)歷的機械變形頻率而改變。平滑肌是許多疾病中的共同路徑,因此,了解在疾病發(fā)生及持續過(guò)程中平滑肌怎樣變化,這是治療方法取得進(jìn)展的重要一步。膀胱壁由三層組織組成,由內而外為黏膜層、肌層和外膜。其中,肌層主要由平滑肌構成。膀胱平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見(jiàn)細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長(cháng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng),高低起伏;細胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。體外培養膀胱平滑肌細胞不僅為組織工程膀胱、尿道提供種植細胞的必要手段,也是研究平滑肌瘤的基礎與前提。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的小鼠膀胱平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的小鼠膀胱平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠孕受體試劑盒 小鼠孕受體試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠孕受體試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠孕受體試劑盒、小鼠孕受體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠孕激素試劑盒 小鼠孕激素試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠孕激素試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠孕激素試劑盒、小鼠孕激素試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠誘導型NO合酶試劑盒 小鼠誘導型NO合酶試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠誘導型NO合酶試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠誘導型NO合酶試劑盒、小鼠誘導型NO合酶試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠游離狀腺原酸試劑盒 小鼠游離狀腺原酸試劑盒 規格型號:96T/48T 小鼠游離狀腺原酸試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠游離狀腺原酸試劑盒、小鼠游離狀腺原酸試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat apoptosis inducing factor (AIF) ELISA Kit 大鼠凋亡誘導因子(AIF)試劑盒
Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor(MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199)ELISAKit小鼠胃腸癌標志物CA199
飲料乙酸激酶法定量試劑盒20次
MouseIerleukin6,IL-6ELISAKit小鼠白介素6(IL-6)試劑盒規格:96T/48T
G蛋白偶聯(lián)受體45抗體
CYP1A2抗體
IL13RA2重組狗 IL13RA2 / IL13R 蛋白 Protein
NR1/NMDAR1 谷受體1 0.5mgNR1/NMDAR1 谷受體1
HAVCR1重組人 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein
CD300A Protein Human 重組人 CD300A 蛋白 (Fc 標簽)
GFRA3 Protein Mouse 重組小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 蛋白
NR1/NMDAR1 谷受體1 0.5mgNR1/NMDAR1 谷受體1
CD300A Protein Human 重組人 CD300A 蛋白 (Fc 標簽)
IL13RA2重組狗 IL13RA2 / IL13R 蛋白 Protein
GFRA3 Protein Mouse 重組小鼠 GFRA3 / GFR-alpha-3 蛋白
HAVCR1重組人 KIM-1 / TIM1 / HACVR1 蛋白 Protein
小鼠膀胱平滑肌細胞大鼠鈣衛蛋白(CALP)試劑盒 ,英文名: CALP ELISA Kit
Porcine follicle stimulating hormone (FSH) ELISA Kit 豬促卵泡素(FSH)試劑盒
轉基因植物NOS基因核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMCP-4/CCL13ELISAKit大鼠單核細胞趨化蛋白4
體液B1高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitIL-1綿羊白介素1
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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