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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
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更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠肝竇內皮細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肝臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7162 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠肝竇內皮細胞分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著(zhù)去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內皮細胞(SEC)是肝臟內所占比例最高的非實(shí)質(zhì)細胞,位于肝竇腔與肝細胞之間,具有物質(zhì)轉運、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細胞所沒(méi)有的窗孔結構、細胞間連結松散、內皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性,從而達到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時(shí),肝竇內皮細胞窗孔逐漸減少或消失,內皮下基膜形成,產(chǎn)生類(lèi)似于連續型毛細血管的結構,這一過(guò)程稱(chēng)為肝竇毛細血管化。它由多種因素引起,其過(guò)程極復雜,在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現,近年來(lái)受到廣泛關(guān)注。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠肝竇內皮采用混合酶灌流消化、反復低速離心、密度梯度離心法,并通過(guò)內皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠肝竇內皮經(jīng)CD31、CD14免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
脂肪酶(LPS)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
醇脫氫酶(ADH)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
脂氧合酶(LOX)試劑盒 紫外分光光度法 50管/48樣
?;D移酶(AAT)試劑盒 可見(jiàn)分光光度法 10管/9樣
植物茉莉酸甲酯(MeJA)ELISA 試劑盒
Human ai nucleolus aibody (ANA) ELISA Kit 人抗核仁抗體(ANA)試劑盒
Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISAKit 豬胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-1)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforaFABP(Humanadipocytefattyacid-bindingprotein)ELISAKit人脂肪細胞型脂肪酸結合蛋白
血液血管緊張素Ⅰ轉化酶2(ACE2)活性熒光定量試劑盒20次
MouseSuperOxidaseDimase,SODELISAKit小鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒
棕櫚?;さ鞍?span>7抗體
叉頭蛋白R2抗體
BMP2重組斑馬魚(yú) BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein
TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原
ACVRL1重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標簽) Protein
ACTR3 Protein Human 重組人 ACTR3 蛋白 (His & GST 標簽)
TFPI Protein Human 重組人 TFPI 蛋白 (His 標簽)
TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 壞死因子受體相關(guān)因子2抗原
ACTR3 Protein Human 重組人 ACTR3 蛋白 (His & GST 標簽)
BMP2重組斑馬魚(yú) BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein
TFPI Protein Human 重組人 TFPI 蛋白 (His 標簽)
ACVRL1重組人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 標簽) Protein
大鼠肝竇內皮細胞小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA 試劑盒
Rat basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長(cháng)因子(bFGF)試劑盒
HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit 人復制蛋白A(RPA-70)試劑盒 進(jìn)口分裝
Human5-Nucleotidase,5-試劑盒人5核苷酸酶(5-)試劑盒
真菌天青曙紅(Azure-eosinate)染色試劑盒50次
Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISAKit小鼠少突膠質(zhì)細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)試劑盒
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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