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廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商

訪(fǎng)問(wèn)量：403

更新時(shí)間：2025-04-09

人骨髓樹(shù)突狀細胞(DC細胞)

商品屬性：

細胞簡(jiǎn)介：

人骨髓樹(shù)突狀分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內。成年動(dòng)物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(cháng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱(chēng)為紅骨髓。出生時(shí)，紅骨髓充滿(mǎn)全身骨髓腔，隨著(zhù)年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的；DC細胞，全稱(chēng)樹(shù)突狀細胞(DC)，是近年來(lái)倍受們關(guān)注的專(zhuān)職抗原呈遞細胞(APC)，能攝取、加工及呈遞抗原，啟動(dòng)T細胞介導的免疫反應。由美國學(xué)者Steinman于1973年在淋巴結中發(fā)現，從脾臟中分離出一類(lèi)與粒細胞、巨噬細胞和淋巴細胞形態(tài)和功都不同的白細胞，因其細胞膜向外伸出，形成與神經(jīng)細胞軸突相似的膜性樹(shù)狀突起，故而命名為樹(shù)突狀細胞。未成熟DC具有較強的遷移能力，成熟DC能有效激活初始型T細胞，處于啟動(dòng)、調控、并維持免疫應答的中心環(huán)節。

原代細胞的培養條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

　　1、細胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí)，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養

　　1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進(jìn)行分瓶試驗；

　　4、長(cháng)期培養時(shí)，淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長(cháng)；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗室分離的人骨髓DC采用密度梯度離心法分離骨髓單個(gè)核細胞、培養過(guò)程添加細胞因子誘導而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗室分離的人骨髓樹(shù)突狀細胞(DC細胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(cháng)特性 半貼半懸浮

細胞形態(tài) 樹(shù)突狀

傳代特性 屬于高度分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。

　?、?消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長(cháng)的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　?、芷鞴倥囵B

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節作用。

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